医学#大三西综备考之生化复习笔记[三]

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时间：2016-06-2611:52:01

六、蛋白质的理化性质

1 、蛋白质的两性电离：蛋白质两端的氨基和羧基及侧链中的某些基团 ，在一定的溶液PH条件下可解离成带负电荷或正电荷的基团 。

2
、蛋白质的沉淀：在适当条件下
，蛋白质从溶液中析出的现象
。包括：

a.丙酮沉淀，破坏水化层。也可用乙醇 。

b.盐析 ，将硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等加入蛋白质溶液
，破坏在水溶液中的稳定因素电荷而沉淀
。

3 、蛋白质变性：在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏 ，从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失。主要为二硫键和非共价键的破坏，不涉及一级结构的改变 。变性后
，其溶解度降低，粘度增加 ，结晶能力消失
，生物活性丧失，易被蛋白酶水解。常见的导致变性的因素有：加热
、乙醇等有机溶剂、强酸 、强碱、重金属离子及生物碱试剂
、超声波、紫外线 、震荡等
。

4
、蛋白质的紫外吸收：由于蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸 ，因此在280nm处有特征性吸收峰
，可用蛋白质定量测定。

5、蛋白质的呈色反应

a.茚三酮反应：经水解后产生的氨基酸可发生此反应，详见二 、3

b.双缩脲反应：蛋白质和多肽分子中肽键在稀碱溶液中与硫酸酮共热 ，呈现紫色或红色 。氨基酸不出现此反应
。蛋白质水解加强
，氨基酸浓度升高，双缩脲呈色深度下降 ，可检测蛋白质水解程度。

七
、蛋白质的分离和纯化

1、沉淀
，见六 、2

2
、电泳：蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的，在电场中能向电场的正极或负极移动 。根据支撑物不同 ，有薄膜电泳、凝胶电泳等
。

3 、透析：利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。

4
、层析：

a.离子交换层析，利用蛋白质的两性游离性质
，在某一特定PH时，各蛋白质的电荷量及性质不同 ，故可以通过离子交换层析得以分离 。如阴离子交换层析
，含负电量小的蛋白质首先被洗脱下来
。

b.分子筛，又称凝胶过滤。小分子蛋白质进入孔内 ，滞留时间长
，大分子蛋白质不能时入孔内而径直流出 。

5、超速离心：既可以用来分离纯化蛋白质也可以用作测定蛋白质的分子量
。不同蛋白质其密度与形态各不相同而分开。