其他专业课#2017考研究生生物化学复习笔记[3]

2017考研复习拉开序幕，考生们可结合西综生物化学复习笔记进行全面的专业课复习 ，为以后的复习打下坚实的基础。

五
、蛋白质结构与功能关系

1、蛋白质一级结构是空间构象和特定生物学功能的基础 。一级结构相似的多肽或蛋白质
，其空间构象以及功能也相似
。

尿素或盐酸胍可破坏次级键

β-巯基乙醇可破坏二硫键

2 、蛋白质空间结构是蛋白质特有性质和功能的结构基础。

肌红蛋白：只有三级结构的单链蛋白质，易与氧气结合 ，氧解离曲线呈直角双曲线 。

血红蛋白：具有4个亚基组成的四级结构
，可结合4分子氧
。成人由两条α-肽链(141个氨基酸残基)和两条β-肽链(146个氨基酸残基)组成。在氧分压较低时，与氧气结合较难 ，氧解离曲线呈S状曲线 。因为：第一个亚基与氧气结合以后
，促进第二及第三个亚基与氧气的结合，当前三个亚基与氧气结合后 ，又大大促进第四个亚基与氧气结合
，称正协同效应
。结合氧后由紧张态变为松弛态。

六
、蛋白质的理化性质

1、蛋白质的两性电离：蛋白质两端的氨基和羧基及侧链中的某些基团，在一定的溶液PH条件下可解离成带负电荷或正电荷的基团 。

2 、蛋白质的沉淀：在适当条件下 ，蛋白质从溶液中析出的现象
。包括：

a.丙酮沉淀，破坏水化层。也可用乙醇 。

b.盐析
，将硫酸铵
、硫酸钠或氯化钠等加入蛋白质溶液，破坏在水溶液中的稳定因素电荷而沉淀。

3、蛋白质变性：在某些物理和化学因素作用下 ，其特定的空间构象被破坏
，从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失
。主要为二硫键和非共价键的破坏，不涉及一级结构的改变。变性后 ，其溶解度降低
，粘度增加，结晶能力消失 ，生物活性丧失
，易被蛋白酶水解 。常见的导致变性的因素有：加热 、乙醇等有机溶剂
、强酸、强碱 、重金属离子及生物碱试剂
、超声波、紫外线 、震荡等
。

4、蛋白质的紫外吸收：由于蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸，因此在280nm处有特征性吸收峰 ，可用蛋白质定量测定。

5
、蛋白质的呈色反应

a.茚三酮反应：经水解后产生的氨基酸可发生此反应
，详见二、3

b.双缩脲反应：蛋白质和多肽分子中肽键在稀碱溶液中与硫酸酮共热，呈现紫色或红色 。氨基酸不出现此反应
。蛋白质水解加强 ，氨基酸浓度升高，双缩脲呈色深度下降
，可检测蛋白质水解程度。

七 、蛋白质的分离和纯化

1
、沉淀，见六、2

2 、电泳：蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的 ，在电场中能向电场的正极或负极移动 。根据支撑物不同
，有薄膜电泳
、凝胶电泳等
。

3、透析：利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。

4 、层析：

a.离子交换层析，利用蛋白质的两性游离性质 ，在某一特定PH时
，各蛋白质的电荷量及性质不同，故可以通过离子交换层析得以分离 。如阴离子交换层析 ，含负电量小的蛋白质首先被洗脱下来
。

b.分子筛
，又称凝胶过滤。小分子蛋白质进入孔内，滞留时间长 ，大分子蛋白质不能时入孔内而径直流出 。

5
、超速离心：既可以用来分离纯化蛋白质也可以用作测定蛋白质的分子量。不同蛋白质其密度与形态各不相同而分开
。